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多肽合成-多肽固相合成的研究发展

 
 

 

多肽固相化学合成法是蛋白质研究领域非常重要的研究方法之一,主要可以分为Boc方法和Fmoc方法,在生物药物、蛋白质工程、免疫学等研究中得到了广泛的应用。

    多肽固相合成的原理是:首先对组成目的肽的氨基酸改造成氨基末端带有保护基的氨基酸。将目的肽第一个氨基酸的羧基以共价键的形式与固相载体(树脂)相连,再使其与相邻氨基酸的羧基发生酰化反应,形成肽键。然后让包含有这两个氨基酸的树脂肽的氨基与下一个氨基酸的羧基反应,不断直至目的肽形成为止。接着目的肽从树脂上裂解,进行氧化折叠,纯化,并化学修饰,最后进行活性鉴定。

    氨基酸在进入目的肽之前,氨基端需要保护基。根据保护基的不同,多肽固相合成方法可以分为两大类:Boc方法和Fmoe方法。这两种方法的合成原理基本相同,但由于保护基有差异,后面所应用的一系列试剂、条件等都发生了相应的改变。

    由于受到某些因素的影响,并非所有的多肽和蛋白质都可以通过固相合成法人工合成。该方法最适合于合成50个氨基酸以内的多肽,这时的合成效率高。当目的肽超过50个氨基酸时,就需要与别的方法结合使用。

    虽然多肽固相合成法经过后人的不断改进和完善,已经能够合成很多具有生物活性的多肽和蛋白质,但是其本身还是存在着很多问题。如直接合成的序列短,合成所需时间长,合成的效率和纯度低,成本高等。这些问题的存在大大限制了多肽固相合成法的应用范围。

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